Immunoprecipitation, CoIP, and ChIP-seq

Die Immunpräzipitation (IP) ist eine der am häufigsten eingesetzten Methoden zur Isolierung von Proteinen und anderen Biomolekülen aus komplexen Gemischen. Sie nutzt die hohe Spezifität von Immunglobulinen sowie deren starke Affinität zu spezifischen antigenen Zielstrukturen.

Eine etablierte Methode – gestern, heute und in Zukunft

IP-Techniken werden häufig eingesetzt, um ein primäres Zielprotein gemeinsam mit anderen Makromolekülen zu isolieren (Co-IP), Protein-DNA-Komplexe zu untersuchen (ChIP), spezifisch modifiziertes genetisches Material anzureichern, beispielsweise methylierte DNA mittels methylated DNA immunoprecipitation (MeDIP), RNA zu isolieren (RNA-IP, RIP) oder Proteinkomplexe mit bestimmten posttranslationalen Proteinmodifikationen zu analysieren.

ChIP: Identifizierung von DNA-Protein-Interaktionen

Als Erweiterung der Co-IP gehören

Fortschritte in genetischen und proteomischen Methoden haben die Anwendungsmöglichkeiten von ChIP erheblich erweitert. Die Kombination von ChIP mit Microarray-Technologie (ChIP-chip) oder Next-Generation Sequencing (

Unabhängig von der Komplexität der jeweiligen Methode bleibt die Immunpräzipitation ein grundlegendes Verfahren der Proteomforschung. Im Zentrum der IP steht ein Immunreagenz – entweder ein Antikörper oder ein vergleichbares alternatives Reagenz. IP-basierte Verfahren gehören zu den technisch anspruchsvolleren Anwendungen für Antikörper, da sie sowohl eine hohe Affinität zum Zielmolekül als auch eine besonders hohe Spezifität erfordern. Diese Anforderungen können zuverlässig vor allem durch Antikörper und andere Reagenzien erfüllt werden, die speziell für IP-basierte Anwendungen charakterisiert wurden.

Antibodies-online bietet mehrere zehntausend Antikörper und Antikörperalternativen, die für IP, ChIP, ChIP-seq und verwandte Methoden geeignet und entsprechend charakterisiert sind. Entdecken Sie unser Sortiment an Produkten für Immunpräzipitation (IP), ChIP und ähnliche Anwendungen.

Typischer Ablauf eines ChIP-seq-Protokolls:

1. Die genomische DNA wird enzymatisch oder mechanisch fragmentiert, nachdem gebundene Proteine mit der DNA quervernetzt wurden.
2. Die DNA-Fragmente werden anschließend gemeinsam mit den fixierten Proteinen immunpräzipitiert.
3. Die Quervernetzungen werden aufgehoben. Anschließend werden die DNA-Fragmente aufbereitet und mit Sequenzierungsadaptern ligiert, die für die verwendete NGS-Plattform geeignet sind.
4. Nach Amplifikation und größenabhängiger Aufreinigung werden die DNA-Fragmente sequenziert. Die erhaltenen Sequenzreads werden anschließend gegen ein Referenzgenom gemappt, um Proteinbindungsstellen zu identifizieren.

Beliebte Antikörper für die Immunpräzipitation