Kompetitive ELISA Kits
Kompetitive ELISAs zur Quantifizierung von kleinen Molekülen, Peptiden und Hormonen in einer Vielzahl von Probentypen. Beim kompetitiven ELISA ist die Signalintensität invers proportional zur Antigenkonzentration: Je höher die Analytkonzentration, desto geringer das Signal.
Das Verfahren basiert auf der Konkurrenz zwischen dem Antigen in der Probe und dem auf der Platte immobilisierten Antigen um eine begrenzte Menge an Antikörpern. Ein primärer (unmarkierter) Antikörper wird zunächst mit der Probe inkubiert. Dieses Gemisch wird anschließend in Wells gegeben, die mit demselben Antigen beschichtet sind. Je mehr Antigen in der Probe vorhanden ist, desto weniger Antikörper stehen für die Bindung an die Platte zur Verfügung.
Nach einem Waschschritt wird ein enzymgekoppelter Sekundärantikörper hinzugefügt, gefolgt von der Substratreaktion. Das entstehende chromogene oder fluoreszente Signal nimmt mit steigender Antigenkonzentration ab.
Kompetitive ELISAs sind besonders geeignet, wenn kein passendes Antikörperpaar verfügbar ist oder das Target zu klein ist, um gleichzeitig von Capture- und Detektionsantikörper gebunden zu werden. Daher werden sie bevorzugt für kleine Moleküle, Peptide und bestimmte Hormone eingesetzt.
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