Cell-Free Protein System

Im Gegensatz zu herkömmlichen zellbasierten Methoden ermöglicht unser zellfreies Expressionssystem die effiziente und skalierbare Produktion rekombinanter Proteine. Dank optimierter Reaktionskomponenten können innerhalb von nur 48 Stunden Ausbeuten von bis zu 2 Gramm pro Liter erzielt werden. Darüber hinaus erlaubt der zellfreie Workflow eine flexible Anpassung des Expressionsprozesses und vereinfacht die gezielte Einführung von Modifikationen oder Zusätzen.

Zellfreies Protein-Expressionssystem – Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Häufig gestellte Fragen zu unseren zellfrei exprimierten Proteinen.

1. Was ist zellfreie Proteinexpression und wie funktioniert sie?

   Wir verwenden einen zellfreien Proteinexpressionsansatz, der die zellulären Maschinen von Tabakpflanzen (N. tabacum) nutzt, um hochwertige rekombinante Proteine zu exprimieren.

2. Welche Vorteile bietet ein zellfreies Proteinexpressionssystem?

   Unser eukaryotisches zellfreies System ermöglicht hohe Ausbeuten bei der Proteinexpression, kurze Produktionszeiten und die Expression komplexer oder toxischer Proteine. Im Vergleich zu traditionellen zellbasierten Systemen stellt die zellfreie Expression eine kosteneffiziente und hoch skalierbare Alternative dar.

3. Kann das zellfreie Expressionssystem komplexe eukaryotische posttranslationale Modifikationen durchführen?

   Ja, wir können nahezu alle Proteinklassen produzieren, einschließlich solcher, die typischerweise schwer zu exprimieren sind. Das für die Expression verwendete Lysat enthält native Mikrosomen aus dem endoplasmatischen Retikulum und dem Golgi-Apparat. Dadurch sind komplexe eukaryotische posttranslationale Modifikationen wie N-Glykosylierung und Disulfidbrücken möglich.

4. Welche Proteinmengen sind verfügbar?

   Die Standardmenge, die wir anbieten, beträgt 250 µg für die Erstproduktion. Abhängig von den Anforderungen Ihres Projekts skalieren wir die Produktion entsprechend Ihrer Bedürfnisse.

5. Welche Maßnahmen zur Qualitätskontrolle werden durchgeführt, um die Integrität des exprimierten Proteins sicherzustellen?

   Wir wenden strenge Qualitätskontrollen an, um sicherzustellen, dass das exprimierte Protein Ihren Spezifikationen und Anforderungen entspricht. Dazu gehören SDS-PAGE und Western Blot zur Verifikation sowie analytische SEC mittels HPLC.

6. Ist die Aktivität des Proteins garantiert?

   Kundenerfahrungen haben gezeigt, dass die exprimierten Proteine aktiv waren. Wir testen jedoch die Aktivität nicht in unserem Labor und übernehmen daher keine Garantie für die Proteinaktivität.

7. Wie lange dauert die Proteinexpression und variiert die Bearbeitungszeit je nach Menge?

   Die Bearbeitungszeit für die Proteinexpression beträgt in der Regel etwa zwei Monate, unabhängig von der bestellten Menge. Zusätzliche Mengen können innerhalb eines Monats nach erfolgreicher Produktion geliefert werden, um eine zeitgerechte Verfügbarkeit für Ihre Forschung oder Anwendung zu gewährleisten.

8. Was passiert, wenn die Proteinexpression nicht erfolgreich ist?

   Im Falle einer fehlgeschlagenen Expression oder Aufreinigung entstehen Ihnen keine Kosten.

9. Welche Protein-Tags werden verwendet?

   Wir empfehlen den Strep-Tag für optimale Reinheit und Ausbeute. Dieser Tag ermöglicht eine effiziente Reinigung des Proteins bei minimalen unspezifischen Interaktionen. Zusätzlich können SUMOstar- oder MBP-Tags eingesetzt werden, um die Löslichkeit des Proteins zu verbessern, falls erforderlich. Sollten Sie bereits Erfahrung mit einem bestimmten Tag haben, berücksichtigen wir dies gerne.

10. Kann das Protein ohne Tag bereitgestellt werden?

    Leider nein. Obwohl wir eine TEV-Spaltstelle in das Konstrukt integrieren können, um eine spätere Entfernung des Tags zu ermöglichen, entfernen wir den Tag nicht im Rahmen unseres Produktionsprozesses.

11. Wie wird das gereinigte Protein versendet und wie sollte es gelagert werden?

    Das exprimierte Protein wird auf Trockeneis versendet, um die Stabilität während des Transports zu gewährleisten. Nach Erhalt sollte es gemäß den Versandhinweisen bei -80 °C gelagert werden.

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