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ModDetect® Panels

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Die ModDetect® Panels von Rockland sind gebrauchsfertige, immunoassay-basierte Reagenzien zum Nachweis spezifischer chemischer Modifikationen in Oligonukleotid-Therapeutika, unabhängig von Sequenz oder Position der Modifikation. antibodies-online freut sich, ModDetect® Panels weltweit anzubieten und internationalen Forschenden direkten Zugang zu diesen Produkten mit der Unterstützung eines vertrauenswürdigen europäischen Vertriebspartners zu ermöglichen.

Was sind ModDetect® Panels?

ModDetect® Panels bestehen aus monoklonalen Antikörperreagenzien, die gegen spezifische chemische Modifikationen gerichtet sind, wie sie in Oligonukleotid-Therapeutika vorkommen, einschließlich Phosphorothioat-(PS-)Backbone-Verknüpfungen und 2′-Zucker-Modifikationen wie 2′-O-Methoxyethyl (2′-MOE) und 2′-O-Methyl (2′-OMe). Da diese Antikörper die chemische Modifikation selbst und nicht die Nukleinsäuresequenz erkennen, können sie für verschiedene Oligonukleotid-Kandidaten wie ASOs, siRNA, mRNA und Aptamere eingesetzt werden, ohne dass eine sequenzspezifische Sondenentwicklung erforderlich ist.

Verfügbare Panel-Formate:

  • Unkonjugiert: für Standard-Workflows in Immunfluoreszenz, IHC und ELISA
  • Biotinyliert: für Sandwich-ELISAs, streptavidinbasierte Capture-Assays und andere biotinvermittelte Formate

Beide Formate sind mit etablierten Immunoassay-Plattformen kompatibel, einschließlich ELISA, Immunzytochemie (ICC) und Immunhistochemie (IHC), wodurch sich ModDetect® Panels unkompliziert in bestehende präklinische Workflows integrieren lassen.

ADME (Absorption, Distribution, Metabolismus, Exkretion)​
Discovery
Präklinisch / Klinisch / Nicht-klinisch
Assay-Typen
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ELISA/ADA &
Immunogenitätsstudien
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IP/Proteinbindung
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In-vitro-Zellkultur/
Potenzstudien
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IHC/Biodistribution
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IF/intrazelluläre
Lokalisierung

ModDetect Leistungsdaten

Intrazelluläre Lokalisierung von PS-modifizierten ASOs

IF of ModDetect Reagent
                PS05

Reagenzien des ModDetect PS Panels ermöglichen eine klare Visualisierung phosphorothioat-modifizierter ASOs innerhalb von Zellen. Unter Verwendung des Klons PS05 wurde in mit Oligonukleotiden behandelten Maus-Gliomzellen eine punktförmige zytoplasmatische Färbung beobachtet, die mit endosomaler Akkumulation übereinstimmt, während in Kontrollen mit Vehikel allein kein Signal nachweisbar war. Diese Daten zeigen, wie ModDetect Antikörper Untersuchungen zur zellulären Aufnahme und zum Trafficking unterstützen, ohne dass markierte oder sequenzspezifische Sonden erforderlich sind.

Abbildung 1. Immunfluoreszenz mit dem ModDetect Reagenz PS05 in Maus-Gliomzellen, die mit einem PS-modifizierten Oligonukleotid-Therapeutikum behandelt wurden. Alpha-Tubulin (rot); PS05 (grün). PS05 wurde in einer Verdünnung von 1:2.000 eingesetzt. Die punktförmige zytoplasmatische Färbung stimmt mit endosomaler Speicherung überein.

Kombinierter Nachweis von PS- und 2′-MOE-Modifikationen in vivo

Dual immunofluorescence detection of a PS/2′-MOE dual-modified ASO gapmer in mouse tissue following subcutaneous delivery (50 mg/kg, 72 h). Anti-PS clone PS03 and Anti-MOE clone MOE4 applied in combination.

Viele Oligonukleotid-Therapeutika enthalten mehr als eine chemische Modifikation, und ModDetect Panels sind darauf ausgelegt, diese Komplexität zu unterstützen. Anti-PS- (Klon PS03) und Anti-MOE-Antikörper (Klon MOE4) wurden gemeinsam eingesetzt, um ein 2′-MOE-modifiziertes ASO 5-10-5 Gapmer nach subkutaner Verabreichung in Mäusen nachzuweisen. Beide Antikörper erzeugten eine starke, spezifische Färbung, die mit der erwarteten Biodistribution des doppelt modifizierten ASO übereinstimmt, und bestätigten damit, dass ModDetect Reagenzien aus verschiedenen Panels innerhalb eines einzelnen Workflows kombiniert werden können.

Abbildung 2. Dualer Immunfluoreszenznachweis eines PS/2′-MOE-doppelt modifizierten ASO-Gapmers in Mausgewebe nach subkutaner Verabreichung (50 mg/kg, 72 h). Anti-PS-Klon PS03 und Anti-MOE-Klon MOE4 wurden in Kombination eingesetzt.

Zytoplasmatische Verteilung von 2′-OMe-modifizierter siRNA in Leberzellen

Immunofluorescence detection of lumasiran siRNA in HepG2 cells using ModDetect Anti-2′-OMe clone OME3. Co-stained with phalloidin (cytoskeleton) and DAPI (nuclei).

Reagenzien des ModDetect 2′-OMe Panels unterstützen den Nachweis OMe-modifizierter Oligonukleotide in physiologisch relevanten Zellmodellen. In humanen HepG2-Hepatoblastomzellen wurde Lumasiran-siRNA mit Klon OME3 nachgewiesen, wobei eine punktförmige zytoplasmatische Färbung beobachtet wurde, die mit endosomaler Einschließung übereinstimmt. Die Kofärbung mit Phalloidin und DAPI lieferte strukturellen Kontext in Bezug auf das Aktin-Zytoskelett und die Zellkerne und unterstützt damit eine zuverlässige Interpretation intrazellulärer Verteilungsmuster.

Abbildung 3. Immunfluoreszenznachweis von Lumasiran-siRNA in HepG2-Zellen mit ModDetect Anti-2′-OMe-Klon OME3. Kofärbung mit Phalloidin (Zytoskelett) und DAPI (Zellkerne).

Verfügbare ModDetect® Panels

ModDetect® Phosphorothioat Panel
ABIN7675637

phosphorothioate backbone-modified oligonucleotides

ModDetect® Phosphorothioat Biotinyliertes Panel
ABIN7675638

phosphorothioate backbone-modified oligonucleotides

ModDetect® 2'-O-Methyl (2'OMe) Panel
ABIN7675641

2'-O-Methyl (2'OMe) backbone-modified oligonucleotides

ModDetect® 2-Methoxyethyl (2'MOE) Panel
ABIN7675639

2-Methoxyethyl backbone-modified oligonucleotides

ModDetect® 2-Methoxyethyl (2'MOE) Biotinyliertes Panel
ABIN7675640

2-Methoxyethyl backbone-modified oligonucleotides

Ergänzen Sie Ihren ModDetect Workflow mit subzellulären Markern

Die Kofärbung von ModDetect® Antikörpern mit kompartimentspezifischen subzellulären Markern stärkt die Dateninterpretation, indem sie strukturellen Kontext für Lokalisierungsbefunde liefert. Endosomale, lysosomale, zytoskelettale und nukleäre Marker sind über antibodies-online erhältlich und wurden zusammen mit ModDetect® Reagenzien in ICC- und Immunfluoreszenz-Workflows eingesetzt, um die intrazelluläre Verteilung zu bestätigen, Trafficking zu beurteilen und publikationsreife Bilddaten zu unterstützen.


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